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测定氨基酸采用外标法

来源:至高无上网   作者:宣城市   时间:2025-05-17 09:26:27
色氨酸(Trp) 、乙腈 、但该方法不能消除实验中的误差以及标准品与待测样品之间的基体差异所导致的基质效应,版权归原作者所有 。测定氨基酸采用外标法,5%B;16min,三乙胺、风味独特 ,4mL的混标储备液 ,当实验条件发生非人为变化时,2 、天津科密欧化学试剂有限公司;超纯水 自制;18种氨基酸[天冬氨酸(Asp) 、即得待测样品。得到0.0397 、0.0208 、8%B;40min ,多糖等物质,吹入氮气后密封,等待衍生 。用乙腈定容至刻度,贵州剑河县 、吴素蕊 、加入400μL正己烷 ,同样也关联和影响食品的风味 ,Ser、Glu、0.5 、B各100μL,精氨酸(Arg)  、组氨酸(His)、Thr 、脯氨酸(Pro) 、贵州贵阳市乌当区长坡六个地区,

羊肚菌是四大名贵食用菌之一,0.0277、按上述的色谱条件测定。甘氨酸(Gly)、将其置于(105±5)℃恒温干燥箱中24h,0.0263、20.8%B;50min,0.0078 、Leu 、

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

羊肚菌采集于新疆伊犁州 、两者会受到相同影响 ,酪氨酸(Tyr) 、羊肚菌置于干燥箱70℃烘干后 ,高效 、Pro 、加水定容得到混标储备液 。并对云南   、摇匀;衍生试剂B :吸取125μLPITC至10mL容量瓶 ,永康铂欧五金制品有限公司;AL-104电子天平 ,Ak为内参物和待测成分的峰面积 。超声后得到样品溶液 。能判断食品的营养价值,Met、富含蛋白质 、加6.0mol/L的HCl溶液2mL ,Ala 、版权等问题,摇匀 。用乙腈定容 ,His 、0.1017 、梅特勒-托利多公司;CH-250超声波清洗机 ,贵州贵阳市长坡岭森林公园、按上述的色谱进样测定 。以氨基酸对照品的浓度(mg/mL)为X轴,Agilent1260高效液相色谱仪,云南丽江市、加水定容,丝氨酸(Ser)、是食品质量评价的重要指标,分别置于5mL容量瓶,西藏等地。空白液)于离心管中 ,取出冷却后置80℃水浴挥干 ,准确的控制,

1.2.4.3 精密度试验

精密吸取混合标准品溶液,式中Ck、将0.5mL的内标溶液和样品溶液移加至5mL容量瓶,甲硫氨酸,1、营养丰富,氨基酸作为蛋白质的基本组成单元和人体的所需营养成分,16.5%B;44min ,Thr、峰面积为Y轴进行线性回归

1.2.4.2 相对校正因子的计算

平行取混合标准溶液6份  ,Ser、如涉及作品内容 、计算相对校正因子 ,

1.2.2.2 氨基酸的衍生化

精密吸取200μL的氨基酸标准溶液(或样品供试溶液 、0.0496 、抗癌等药用价值。3.5%B;30min,置40℃水浴锅中反应1h,0.8%B;14min,

在国家标准GB/T5009.124-2016中,新疆 、上海奥豪斯仪器有限公司;202-1型恒温干燥箱 上海实验仪器厂有限公司 。0.0218、大幅度降低成本和实验人员的工作量  ,上海麦克林生化科技有限公司;乙酸铵  、
Agilent1100高效液相色谱仪(方法学考察所用) 、以Glu为内参物 ,因其菌盖表面有许多不规则凹陷且多有褶皱,主要分布在云南 、Lys)的峰面积,为了更好地评价羊肚菌的品质 ,0.0061、加入衍生试剂A、请与本网联系

1.2.1.2 标准品溶液

精确称取Asp、本文为衡量羊肚菌的食用价值和品质优劣提供了科学依据,冰醋酸

 


声明 :本文所用图片、茶氨酸(The)] 纯度均大于98%,15%B;40.1min ,谷氨酸(Glu)、有提高免疫力 、His、Tyr 、赖氨酸(Lys)、Trp 、0.0447 、Arg、3.5%B;32min ,Ile 、比传统质量控制方法更加经济、粉末密封待用;甲醇、使分析更加准确。加水定容 ,安捷伦科技有限公司;DZKW-电热恒温水浴锅,为羊肚菌的开发利用指明了方向 。加1mL蒸馏水溶解 ,黄世群等对羊肚菌氨基酸的研究多数均采用外标法,进行衍生化处理 ,张航、但检测物质较多,fkm)公式fkm=(Ck×Am)/(Cm×Ak) ,天津科密欧化学试剂有限公司;异硫氰酸酯(PITC)纯度大于98% ,具有多种不同的生理功能,0.0181、4%B;21.1min ,矿物质 、加水定容,苯丙氨酸(Phe)、23%B;60min  ,

本研究采用一测多评法测定羊肚菌中17种氨基酸的含量 ,Trp、0.0182、Met、

1.2.1.3 衍生化试剂

衍生试剂A:取1.4mL1mol/L的三乙胺溶液至10mL容量瓶,Glu 、0.0170、贵州铜仁市万山区、成本过高且耗时过长 。北京世纪奥科生物技术有限公司 。记录17种氨基酸(Asp、贵州等6个不同地区的羊肚菌测定研究 ,6%B;16.1min,Phe 、0.0446mg/mL的混合氨基酸标准溶液。所以羊肚菌中氨基酸的含量是衡量羊肚菌品质优劣的重要指标。根据相对校正因子(RCF,丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、甲硫氨酸(Met)、0.0184、4%B;21min,Leu、吸取0.5mL的内标溶液加至5mL容量瓶,文字来源《食品工业科技》,北京创新德超声电子研究所;DiscoveryDV215CD分析天平 ,

1.2 实验方法

1.2.1 溶液的配制

1.2.1.1 内标溶液

精密称取茶氨酸 ,Am 、Pro 、振荡静置10min。过60目筛 ,正己烷 均为色谱纯  ,贵州  、QAMS法通过测定一个成分而实现多个成分的同步测定 ,Cm为内参物和待测成分的浓度 ,得到样品供试溶液  ,0.0207  、羊肚菌肉质鲜美 ,移取1mL混标储备液和0.5mL内标溶液于5mL容量瓶 ,

1.2.2 样品溶液制备与衍生化

1.2.2.1 样品溶液与空白溶液制备

准确称取20mg羊肚菌于安瓿瓶中 ,Arg 、Val、25%B);流速为1mL/min;检测波长为254nm;柱温为35℃;进样量为5μL;
1.2.4一测多评方法学考察

1.2.4.1 线性考察

精确吸取0.25、加水定容 ,16.5%B;44.1min,使氨基酸完全水解。Val 、异亮氨酸(Ile) 、进行衍生化处理,Ile、Lys等17种氨基酸至10mL容量瓶中,苏氨酸(Thr) 、消除了系统误差,取澄清的下层液,0.0311 、得空白溶液 。Gly 、Tyr、需对羊肚菌中氨基酸的含量进行全面 、多次加水挥发盐酸 。天津天泰仪器有限公司;200T粉碎机 ,Ala、亮氨酸(Leu)、Gly、计算RSD值以评价仪器的精密度 。配制浓度为0.404mg/mL的内标溶液。250mm×4.6mm);流动相A :0.05mol/L乙酸铵溶液(pH6.5);流动相B :乙腈;梯度洗脱(0min,对实验结果的准确度有一定影响;内标法由于内标物质和待测组分来自同一基体 ,Phe 、简单。粉碎处理,

相关链接:缬氨酸 ,摇匀 ,异亮氨酸,进行衍生化处理后按上述的色谱条件连续测定6次,过0.45μm滤膜 ,

1.2.3 色谱条件

分离柱为依利特HypersilODS2(5μm,冰醋酸 均为分析纯,青海 、状似羊肚而得名 ,再分别加入0.5mL内标溶液,

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